• facebook
  • linkedin
  • youtube
page_banner

Plant Total RNA Isolation Kit Total RNA Purificaiton Kit za rastline z nizko vsebnostjo polisaharidov in polifenolov

Opis kompleta:

Kat.št.RE-05011/05014

Za čiščenje celotne RNK iz splošnih rastlinskih vzorcev, ki vsebujejo malo polisaharidnih in polifenolnih komponent.

Hitro ekstrahirajte visokokakovostno skupno RNK iz rastlinskih vzorcev z nizko vsebnostjo polisaharidov in polifenolov.

Brez RNaze

Učinkovito odstranite DNK z DNA-Cleaning Column

Odstranite DNA brez dodajanja DNaze

Enostavno—vsi postopki se zaključijo pri sobni temperaturi

Hitro – operacijo lahko zaključite v 30 minutah

Varno - ni uporabljen organski reagent


Podrobnosti o izdelku

Oznake izdelkov

pogosta vprašanja

PRENESITE VIRE

Specifikacije

50 priprav, 200 priprav

Komplet uporablja vrtljivo kolono in formulo, ki ju je razvil Foregene, ki lahko učinkovito ekstrahira visoko čisto in visokokakovostno celotno RNK iz različnih rastlinskih tkiv z nizko vsebnostjo polisaharidov in polifenolov.Za rastlinske vzorce z visoko vsebnostjo polisaharidov ali polifenolov je priporočljivo uporabiti komplet Plant Total RNA Isolation Plus, da dobite boljše rezultate ekstrakcije RNA.Komplet vsebuje kolono za čiščenje DNK, ki lahko zlahka odstrani genomsko DNK iz supernatanta in tkivnega lizata.Kolona samo z RNA lahko učinkovito veže RNA.Komplet lahko obdeluje veliko število vzorcev hkrati.

Celoten sistem ne vsebuje RNaze, zato prečiščena RNA ne bo razgrajena.Pufer PRW1 in pufer PRW2 lahko zagotovita, da dobljena RNA ni kontaminirana z beljakovinami, DNK, ioni in organskimi spojinami.

Sestavni deli kompleta

Medpomnilnik PSL1, Medpomnilnik PS, Medpomnilnik PSL2

Medpomnilnik PRW1, medpomnilnik PRW2

ddH brez RNaze2O, stolpec za čiščenje DNK

Stolpec samo RNA

Navodila

Značilnosti in prednosti

■ Delovanje pri sobni temperaturi (15-25 ℃) skozi celoten proces, brez ledene kopeli in nizkotemperaturnega centrifugiranja.
■ Celoten komplet Brez RNaze, ni vam treba skrbeti za razgradnjo RNK.
■ DNA-Cleaning Column se specifično veže na DNA, tako da lahko komplet odstrani kontaminacijo genomske DNA brez dodajanja DNaze.
■ Visok izkoristek RNA: kolona samo za RNA in edinstvena formula lahko učinkovito očistita RNA.
■ Hitra hitrost: enostavno upravljanje in dokončanje v 30 minutah.
■ Varnost: organski reagent ni potreben.
■ Visoka kakovost: prečiščeni fragmenti RNA so visoke čistosti, brez beljakovin in drugih nečistoč ter lahko ustrezajo različnim nadaljnjim eksperimentalnim aplikacijam.

123

Aplikacija kompleta

Primeren je za ekstrakcijo in čiščenje celotne RNK iz svežih ali zamrznjenih vzorcev rastlinskega tkiva (zlasti svežega rastlinskega listnega tkiva) z nizko vsebnostjo polisaharidov in polifenolov.

Potek dela

rastlinska skupna RNA - preprost potek dela

Diagram

Komplet za izolacijo celotne rastlinske RNK6

Plant Total RNA Isolation Kit Plus je obdelal 50 mg svežih listov polisaharidov in polifenolov, 5 % prečiščene RNA pa smo testirali z elektroforezo.
1: Banana
2: Ginko
3: bombaž
4: Granatno jabolko

Shranjevanje in rok uporabnosti

Komplet lahko hranite 12 mesecev pri sobni temperaturi (15–25 ℃) v suhem okolju in 2–8 ℃ dlje (24 mesecev).

Pufer PSL1 lahko shranite pri 4 ℃ 1 mesec po dodajanju 2-hidroksi-1-etantiola (neobvezno).


  • Prejšnja:
  • Naslednji:

  • Vodnik za analizo problemov

    Naslednja analiza težav, na katere lahko naletiteRastlina SkupajRNA extraction will help you with your experiments. In addition, for other experimental or technical problems in addition to operating instructions and problem analysis, we have dedicated technical support to help you. If you have any needs, please contact us at: 028-83360257 or E-mali : Tech@foregene.com.

    Vrtilni stolpec je zamašen

    Blokada vrtilne kolone bo povzročila zmanjšanje izkoristka RNA ali celo nezmožnost čiščenja za pridobitev RNA, kakovost pridobljene RNA pa bo nizka.

    Analiza pogostih vzrokov:

    1. Vzorec ni popolnoma zlomljen.

    Nepopolna fragmentacija vzorca lahko blokira DNA-Cleaning Column, kar lahko vpliva tudi na izkoristek in kakovost RNA.Priporočamo, da pri fragmentaciji vzorca hitro zdrobite zadostne količine tekočega dušika, da čim bolj razbijete tkiva, kot so celične stene in celične membrane vzorcev.Za rastlinske vzorce polifenolnih polisaharidov priporočamo, da uporabite Plant Total RNA Isolation Kit Plus.

    2. Aspirirajte izolirani supernatant DNA-Cleaning Columne, aspirirajte morebitne pelete celičnih ostankov.

    Aspirirana peleta celičnih ostankov lahko zamaši kolono samo z RNA med postopki adsorpcije RNA (glejte 5. korak postopka, 6. korak postopka s polisaharidnimi polifenoli).Priporočamo, da ste pri aspiraciji tega supernatanta previdni, da preprečite aspiracijo celičnih ostankov.

    3. Začetna količina vzorca je prevelika.

    Prekomerna uporaba vzorca bo povzročila nepopolno fragmentacijo vzorca ali nepopolno lizo celic s pufrom PRL1 ali pufrom PSL1, kar bo povzročilo zamašeno čistilno kolono za postopke čiščenja.Plant Total RNA Isolation Kit ima začetni maksimum 50 mg na posamezno čiščenje operiranega vzorca.Za rastlinske vzorce polifenolnih polisaharidov priporočamo, da preizkusite Plant Total RNA Isolation Kit Plus.

    4. Temperatura centrifuge je prenizka.

    Izolacija celotne RNK in čiščenje, razen razgradnje vzorčnega tkiva s tekočim dušikom, vsi koraki se izvajajo pri sobni temperaturi (20–25 °C).Nekatere nizkotemperaturne centrifuge imajo temperature pod 20 °C, kar lahko povzroči blokade v koloni za čiščenje DNK in/ali koloni samo za RNK.Če se to zgodi, nastavite temperaturo centrifuge na 20–25 °C in predhodno segrejte mešanico za lizo in/ali dodatek supernatanta za ločevanje etanola na 37 °C.

    RNK ni ekstrahirana ali pa je izkoristek RNK nizek

    Običajno obstaja veliko dejavnikov, ki vplivajo na učinkovitost predelave, kot so: vsebnost RNK v vzorcu, metoda delovanja, volumen elucije itd.

    Spodnja analiza pogostih vzrokov:

    1. Med operacijo je bila izvedena ledena kopel ali centrifugiranje pri nizki temperaturi (4 °C).

    Predlog: Delujte pri sobni temperaturi (15-25 °C) v celotnem procesu, ne uporabljajte ledene kopeli in nizkotemperaturnega centrifugiranja.

           2.RNA je bila razgrajena zaradi nepravilnega shranjevanja vzorca ali dolgoročnega shranjevanja vzorca.

    Priporočilo: Sveže zbrane vzorce je treba na hitro zamrzniti v tekočem dušiku in nato dolgo časa shraniti pri -80 °C, izogibajte se ponovnemu zamrzovanju in odmrzovanju vzorcev;ali vzorce takoj namočite v raztopino RNA stabilizatorja RNAlater (živalski vzorci).

           3.Nezadostna fragmentacija vzorca in liza povzročita blokado čistilne kolone.

    Predlog: Ko meljete tkivo, se prepričajte, da je tkivo dovolj zmleto, in ga hitro prenesite v vnaprej pripravljen pufer PSL1 (potrdite, da je bil dodan pravi delež β-ME, glejte 1. korak postopka).

    4.Eluent je bil dodan nepravilno.

    Predlog: Prepričajte se, da je ddH brez RNaze2O kapljamo v sredino membrane čistilne kolone.

    5. Pufru PSL2 ali pufru PRW2 ni bila dodana pravilna količina absolutnega etanola.

    Predlog: Sledite navodilom, dodajte pravilno količino absolutnega etanola v pufer PSL2 in pufer PRW2 ter dobro premešajte, preden uporabite komplet.

    6. Količina vzorca tkiva je neustrezna.

    Predlog: Uporabite 50 mg tkiva na 500 μl pufra PSL1.Uporaba preveč tkiva bo zmanjšala količino ekstrahirane RNA, zmanjšana pa bo tudi čistost nastale RNA.Močno priporočamo, da začetni odmerek vzorca ne sme preseči 50 mg na operacijo ekstrakcije RNK.

    7. Neustrezen volumen elucije ali nepopolna elucija.

    Predlog: Volumen eluenta čistilne kolone je 50-200 μl;če učinek elucije ni zadovoljiv, je priporočljivo podaljšati čas na sobni temperaturi po dodajanju predhodno segretega ddH brez RNaze2O, na primer 5-10 min.

    8. Čistilna kolona ima ostanek etanola po izpiranju s pufrom PRW2.

       Predlog: Če prazno epruveto centrifugirate 1 minuto in po izpiranju v pufru PRW2 še vedno ostane etanol, lahko podaljšate čas centrifugiranja prazne epruvete na 2 minuti ali postavite čistilno kolono na sobno temperaturo za 5 minut, da v celoti odstranite preostali etanol.

    9. Komplet je bil uporabljen nepravilno.

       Predlog: Za rastlinske vzorce polifenolnih polisaharidov z uporabo običajnih kompletov, kot je Plant Total RNA Isolation Kit, morda ne bo mogoče pridobiti idealnih vzorcev RNA.Priporočamo vam uporabo kompleta Plant Total RNA IsolationKit Plus, ki je posebej zasnovan za rastlinske vzorce polifenolnih polisaharidov.Komplet, posebej razvit za ekstrakcijo RNK iz rastlinskih vzorcev polifenolov in polisaharidov.

    Vrednost OD260/OD280 je nizka

    RNK elucija z ddH2O in se uporablja za odčitke spektrofotometra, ima za posledico nizke vrednosti OD260/OD280.Priporočamo uporabo 10 mM Tris-HCl, pH 7,5 (namesto ddH brez RNaze2O za eluacijo RNA), da dobite razmeroma pravilne vrednosti OD260/OD280, glejte »Preizkusi koncentracije in čiščenja RNA« na strani 19.

    Očiščena RNA se razgradi

    Kakovost prečiščene RNA je povezana z dejavniki, kot so ohranitev vzorca, kontaminacija z RNazo in manipulacija.

    Analiza pogostih vzrokov:

    1. Vzorci tkiv po odvzemu niso bili pravočasno shranjeni.

        Priporočilo: Če vzorcev tkiva ne uporabite pravočasno po odvzemu, jih takoj shranite v tekoči dušik pri nizki temperaturi ali jih po hitrem zamrzovanju v tekočem dušiku prenesite na -80 °C za dolgotrajno shranjevanje ali pa vzorce takoj potopite v raztopino stabilizatorja RNA RNAlater (živalski vzorci).Za ekstrakcijo RNK poskusite uporabiti sveže zbrane vzorce tkiva.

    2. Ponavljajoče se zamrzovanje in odmrzovanje vzorcev tkiva.

       Predlog: Ko shranjujete vzorce tkiv, je najbolje, da jih razrežete na majhne koščke za konzerviranje in del teh odstranite, ko jih uporabljate, da se izognete razgradnji RNK zaradi ponavljajočega se zamrzovanja in odmrzovanja vzorcev.

    3. RNazo vnesemo v operacijski sobi ali ne nosimo rokavic za enkratno uporabo, maske itd.

       Predlog: Poskuse ekstrakcije RNK je najbolje izvajati v ločenih operacijah RNK, laboratorijsko mizo pa je treba pred poskusom očistiti, med poskusom pa je treba nositi rokavice in maske za enkratno uporabo, da se v največji meri izognete razgradnji RNK, ki jo povzroči vnos RNaze.

    4. Reagent je med uporabo kontaminiran z RNazo.

       Predlog: zamenjajte z novo serijo kompletov za ekstrakcijo celotne rastlinske RNK za sorodne poskuse.

    5. Centrifugalne epruvete in konice pipet, ki se uporabljajo za manipulacijo RNK, so kontaminirane z RNazo.

    Predlog: Prepričajte se, da so centrifugalne epruvete, konice pipet, pipete itd., ki se uporabljajo pri ekstrakciji RNA, brez RNaze.

    Navodila za uporabo:

    Priročnik z navodili za komplet za izolacijo rastlinske RNA

    Tukaj napišite svoje sporočilo in nam ga pošljite