Komplet za izolacijo virusne DNK in RNK Kompleti za pripravo za ekstrakcijo virusne DNK in RNK
Specifikacije
50 priprav, 200 priprav
Komplet za izolacijo ekstrakcije nukleinske kisline za čiščenje virusne RNK uporablja vrtljivo kolono in formulo, ki jo je razvil Foregene, ki lahko učinkovito ekstrahira virusno RNK visoke čistosti in kakovosti iz vzorcev, kot so plazma, serum, telesna tekočina brez celic in supernatant celične kulture.Komplet posebej dodaja linearni akrilamid, ki zlahka zajame majhne količine RNA iz vzorcev.RNA-Only Column lahko učinkovito veže RNA.Komplet lahko obdeluje veliko število vzorcev hkrati.
Celoten komplet ne vsebuje RNaze, zato prečiščena RNA ne bo razgrajena.Pufer viRW1 in pufer viRW2 lahko zagotovita, da pridobljena virusna nukleinska kislina ne vsebuje beljakovin, nukleaze ali drugih nečistoč, kar je mogoče uporabiti neposredno za nadaljnje poskuse molekularne biologije.
Sestavni deli kompleta
| Linearni akrilamid |
| Medpomnilnik DRL |
| Medpomnilnik RW1, Medpomnilnik RW2 |
| ddH brez RNaze2O |
| Stolpec DNA/RNA |
| Navodila |
Značilnosti in prednosti
■ Delovanje pri sobni temperaturi (15-25 ℃) skozi celoten proces, brez ledene kopeli in nizkotemperaturnega centrifugiranja.
■ Celoten komplet Brez RNaze, ni vam treba skrbeti za razgradnjo RNK.
■ Visok izkoristek nukleinske kisline: kolona samo za DNA/RNA in edinstvena formula lahko učinkovito očistita DNA in RNA.
■ Velika zmogljivost obdelave vzorcev: vsakič je mogoče obdelati do 200 μl vzorcev.
■ Hitra hitrost: enostavno upravljanje in dokončanje v 20 minutah.
■ Varnost: organski reagent ni potreben.
■ Visoka kakovost: prečiščeni fragmenti RNA so visoke čistosti, brez beljakovin in drugih nečistoč ter lahko ustrezajo različnim nadaljnjim eksperimentalnim aplikacijam.
Aplikacija kompleta
Primeren je za ekstrakcijo in čiščenje virusne nukleinske kisline v vzorcih, kot so plazma, serum, telesna tekočina brez celic in supernatant celične kulture.
Potek dela
Diagram
Shranjevanje in rok uporabnosti
■ Ta komplet lahko shranjujete 24 mesecev v suhih pogojih pri sobni temperaturi (15-25 ℃);če ga je treba hraniti dlje časa, ga lahko hranimo pri 2–8 ℃.
■ Raztopino linearnega akrilamida lahko hranite pri sobni temperaturi 7 dni;po prejemu kompleta ga vzemite ven in shranite pri -20°C.
■ Po dodajanju linearnega akrilamida v pufer DRL ga lahko shranjujete pri 2–8 °C do 48 ur.Uporabite že pripravljeno rešitev.
Vodnik za analizo problemov
Sledi analiza težav, na katere lahko naletite pri ekstrakciji virusne DNA/RNA, v upanju, da vam bo v pomoč pri poskusih.Poleg tega imamo namensko tehnično podporo za pomoč pri drugih eksperimentalnih ali tehničnih težavah, ki niso navodila za uporabo in analiza težav.Če imate kakršne koli potrebe, nas kontaktirajte na: 028-83360257 ali na e-pošto:
Tech@foregene.com.
Brez ekstrakcije nukleinske kisline ali nizek izkoristek nukleinske kisline
Običajno obstaja veliko dejavnikov, ki vplivajo na učinkovitost predelave, kot so: vsebnost nukleinske kisline v vzorcu, metoda delovanja, volumen elucije itd.
Analiza pogostih vzrokov:
1. Med postopkom je bila izvedena ledena kopel ali centrifugiranje pri nizki temperaturi (4 °C).
Predlog: Delujte pri sobni temperaturi (15-25 °C) skozi celoten postopek, ne uporabljajte ledene kopeli in centrifugiranja pri nizki temperaturi.
2. Vzorec je bil nepravilno shranjen ali pa je bil vzorec shranjen predolgo.
Priporočilo: Vzorce hranite pri -80°C in se izogibajte ponavljajočemu se zamrzovanju in odmrzovanju;poskusite uporabiti sveže zbrane vzorce za ekstrakcijo nukleinske kisline.
3. Nezadostna liza vzorca.
Priporočilo: Prepričajte se, da sta vzorec in delovna raztopina za lizo temeljito premešana in inkubirana pri sobni temperaturi (15-25 °C) 10 minut.
4. Nepravilno dodajanje eluenta.
Predlog: Prepričajte se, da je ddH2O brez RNaze dodan po kapljicah na sredino membrane čistilne kolone in ga ne spustite na obroč čistilne kolone.
5. Pufru RW2 ni bil dodan pravilen volumen absolutnega etanola.
Predlog: Sledite navodilom, dodajte pravilno količino absolutnega etanola v pufer RW2 in dobro premešajte pred uporabo kompleta.
6. Neprimerna količina vzorca.
Predlog: 200 µl vzorca se obdela za vsakih 500 µl pufra DRL.Prekomerna obdelava vzorca bo povzročila manjši izkoristek ekstrakcije nukleinske kisline.
7. Neustrezen volumen elucije ali nepopolna elucija.
Priporočilo: Volumen eluenta čistilne kolone je 30-50 μl;če učinek elucije ni zadovoljiv, je priporočljivo podaljšati čas pri sobni temperaturi po dodajanju predhodno segretega ddH2O brez RNaze, na primer za 5-10 minut.
8. Etanol ostane na koloni po izpiranju s pufrom RW2.
Predlog: Če po centrifugiranju s pufrom RW2 2 minuti ostane etanol, lahko kolono po centrifugiranju za 5 minut postavite na sobno temperaturo, da v celoti odstranite preostali etanol.
Očiščena nukleinska kislina se razgradi
Kakovost prečiščene nukleinske kisline je povezana z ohranjenostjo vzorca, kontaminacijo z RNazo, delovanjem in drugimi dejavniki.Analiza pogostih vzrokov:
1. Zbrani vzorci niso bili pravočasno shranjeni.
Predlog: Če vzorca ne uporabite pravočasno po odvzemu, ga takoj shranite pri -80 °C pri nizki temperaturi.Za ekstrakcijo RNK poskusite uporabiti sveže zbrane vzorce.
2. Zberite vzorce ter jih večkrat zamrznite in odtajajte.
Predlog: Izogibajte se zamrzovanju in odmrzovanju (ne več kot enkrat) med zbiranjem in shranjevanjem vzorcev, sicer se bo izkoristek nukleinske kisline zmanjšal.
3. RNazo vnesemo v operacijski sobi oziroma ne nosimo rokavic, mask za enkratno uporabo ipd.
Priporočilo: poskuse ekstrakcije RNA je najbolje izvajati v ločeni operacijski sobi RNA, laboratorijsko mizo pa je treba pred poskusom očistiti.
Med poskusom nosite rokavice in maske za enkratno uporabo, da se v največji meri izognete razgradnji RNK, ki jo povzroči vnos RNaze.
4. Reagent je bil med uporabo kontaminiran z RNazo.
Priporočilo: zamenjajte z novim kompletom za izolacijo virusne DNA/RNA za sorodne poskuse.
5. Centrifugalne epruvete in konice pipet, ki se uporabljajo za manipulacijo RNK, so kontaminirane z RNazo.
Predlog: Prepričajte se, da so centrifugalne epruvete, konice pipet, pipete itd., ki se uporabljajo za ekstrakcijo RNK, brez RNaze.
Prečiščena nukleinska kislina vpliva na nadaljnje poskuse
DNK in RNK, prečiščeni s čistilno kolono, če sta vsebnost solnih ionov in beljakovin previsoka, bo to vplivalo na nadaljnje poskuse, kot so: PCR pomnoževanje, povratna transkripcija itd.
1. Eluirani DNA in RNA imata preostale ione soli.
Predlog: Prepričajte se, da je pufru RW2 dodan ustrezen volumen absolutnega etanola, in čistilno kolono dvakrat sperite pri hitrosti centrifugiranja, navedeni v navodilih za uporabo;Izvedite centrifugiranje, da zmanjšate kontaminacijo z ioni soli.
2. Eluirani DNA in RNA imata ostanke etanola.
Predlog: Po potrditvi izpiranja s pufrom RW2 izvedite centrifugiranje praznih epruvet pri hitrosti centrifugiranja v navodilih za uporabo;če je še vedno ostanek etanola, lahko prazno epruveto centrifugirate in jo nato za 5 minut postavite na sobno temperaturo, da v največji meri odstranite ostanek etanola.
Navodila za uporabo:
Priročnik z navodili za komplet za izolacijo virusne DNK in RNK
