Ekstrakcija nukleinske kisline je uvodna veščina za poskuse molekularne biologije.Ali lahko obvlada in spretno uporablja to veščino, je postalo tudi predpogoj za poznejše eksperimentatorje, da nadgradijo v eksperimentalne mojstre.
Glede na različne raziskovalne materiale so eksperimentatorji razdeljeni predvsem na naslednje tri vrste:
Živalska smer, rastlinska smer, mikrobiološka smer
Vsak tip eksperimentatorja bo še naprej kopiral kopije, da bi gojil nabor ekskluzivnih veščin za določene vzorce.
Danes želi urednik eksperimentatorjem prinesti nekaj opreme in rekvizitov, ki niso na voljo skozi ječo.Z njimi lahko hitro nadgradite v vse smeri.Postati poskusni bog niso sanje.
Ta številka je namenjena poklicnim eksperimentatorjem rastlin (tudi eksperimentatorji drugih poklicev se lahko učijo iz nje~).
Verjamem, da bo vsaka generacija eksperimentatorjev že slišala za klasične metode ekstrakcije rastlinske nukleinske kisline, ki so jih njihovi predhodniki prenašali iz generacije v generacijo.Tri velika imena v industriji pridobivanja rastlin.
Čeprav so veliki fantje odlični, imajo še vedno nekaj neizogibnih pomanjkljivosti.
TRIzol metoda
Pogosto se uporablja za ekstrakcijo
RNA
●Strupeno in okorno
● Vsebuje kontaminacijo genoma
metoda CTAB
Pogosto se uporablja za ekstrakcijo
genomDNK
● Potratno
● Težje je odstraniti CTAB s pranjem kot sol, majhna količina ostankov bo imela velik vpliv na aktivnost encimov
metoda SDS
Pogosto se uporablja za ekstrakcijo
plazmid
●Ni primerno za rastline z visoko vsebnostjo polisaharidov
●Okužba z beljakovinami
V tej moderni družbi z dvojno hitrimi ponovitvami posodabljanja tradicionalne metode delovanja ne morejo več zadovoljiti potreb eksperimentatorjev, zato so nadgradnje opreme neizbežne.
Foregene Nucleic Acid Extraction Kit je N-krat testiralo na desetine eksperimentatorjev.Je enostaven za uporabo, ne uporablja strupenih reagentov in ne dodaja nobenih encimov.Pridobljena nukleinska kislina je visoke čistosti, kar je bistveno za vsakodnevno ekstrakcijo odličnih eksperimentatorjev.
Foregene komplet za izolacijo RNA
Tukaj bom eksperimentatorjem razkril tudi skrito tehniko delovanja, to je izbira ustrezne metode ekstrakcije glede na vrsto rastline (metoda za določanje vrste rastline je na koncu članka!), saj imajo nekateri rastlinski polisaharidi in polifenoli visoko vsebnost, tradicionalne metode pa so smrtonosne.Ni dovolj za nadzor.
No, tako je...
Metoda TRIzol je neposredno pokleknila pod vzorce z visoko vsebnostjo polisaharidov in polifenolov, kot so bananini listi, listi ginka in listi bombaža.
V ta namen je Foregene razvil dve učinkoviti orodji za eksperimentatorje.Komplet za ekstrakcijo rastlinske RNA z nizko vsebnostjo polisaharidov in polifenolov ter visoko vsebnostjo polisaharidov in polifenolov lahko ciljano ubije sovražnike, tako da se eksperimentatorji ne bojijo več različnih rastlin.Samo neposredno zamenjajte opremo!
Poleg potrebe po nadgradnji metode ekstrakcije je treba nadgraditi tudi postopke predhodne obdelave vzorcev.
Zaradi posebne strukture rastlinskih vzorcev je korenine in trša stebla nekaterih rastlin težje zmleti in enakomerno zdrobiti.
V brusilni industriji približno 80 % ljudi uporablja za mletje tekoči dušik, medtem ko manj kot 20 % uporablja električno brušenje in nihanje brusnih kroglic.
Čeprav je mletje s tekočim dušikom poceni in enostavno za uporabo, je vsakokratno mletje nočna mora za eksperimentatorje z velikimi zahtevami po vzorcu!Če malta ni očiščena, bo to povzročilo navzkrižno kontaminacijo med vzorci.
Učinek električnega mletja se razlikuje od osebe do osebe, delovne navade eksperimentatorjev bodo imele večji vpliv na celovitost nukleinske kisline, po potrebi pa je potrebno delovanje pri nizki temperaturi.
tako lahko nihanje brusnih kroglic velja za trenutno preprosto in učinkovito opremo za mletje.
Skupni načini nihanja vključujejo navpično nihanje, vodoravno izmenično nihanje in tridimenzionalno (vodoravno nihanje).Vendar pa drobilnik tkiva Foregene prebija obstoječi model in uporablja novo metodo 4D oscilacije, da naredi mletje bolj enakomerno.
Izpolnjevanje različnih zahtev glede vzorcev, enostavno upravljanje
Edinstvena 4D tehnologija drobljenja, učinkovitost drobljenja se poveča za 20 %
Vzorec je popolnoma zaprt, brez navzkrižne kontaminacije
Tih, ≤56 decibelov
Primerjaj rezultate poskusa z valom~
Testni vzorec: 50mg listov pšenice (nizka vsebnost polisaharidov in polifenolov)
Tip izvlečka nukleinske kisline: RNA
Količina: 5μl
Uporabljen komplet za ekstrakcijo je Foregene Plant Total RNA Extraction Kit (RE-05011)
Če primerjamo podatke in graf elektroforeze, je razvidno, da sta koncentracija in čistost RNA, ekstrahirane po strojnem mletju, višji kot pri mletju s tekočim dušikom.Ker lahko strojno mletje vzorec bolj popolno zlomi, je mogoče majhno RNA bolje izločiti in ohraniti celovitost RNA.
Testni vzorec: 50 mg listov ginka (visoka vsebnost polisaharidov in polifenolov)
Tip izvlečka nukleinske kisline: RNA
Količina: 5μl
Uporaba kompleta za ekstrakcijo celotne RNK s polisaharidnimi polifenoli Foregene (RE-05021)
Oglejte si to skupino vzorcev z visoko vsebnostjo polisaharidov in polifenolov.Učinek je še bolj očiten.Z enako čistostjo je koncentracija RNK, ki se mleti s strojem, skoraj 5-krat večja kot pri mletju s tekočim dušikom, majhna RNK pa je še vedno slabo vidna ~
Če menite, da nobena od zgornjih naprav ni dovolj hitra, mora urednik pripraviti ultimativno opremo!
Serija Plant Direct PCR
Edinstvena značilnost te opreme je, da rastlinskih listov ali semen ni treba zmleti in zlomiti, temveč jih vržemo neposredno v EP epruveto za lizo, nastalo mešanico za lizo pa lahko uporabimo kot predlogo za reakcijo PCR.Preprosto je kot en korak hitreje!Hkrati je serija neposrednih PCR Foregene Plants opremljena s sistemom za preprečevanje onesnaževanja UNG, tako da eksperimentatorji ne skrbijo več zaradi aerosolnega onesnaženja v laboratoriju in lahko enostavno izvedejo poskus.
Nasveti za presojo:
Kako presoditi, ali gre za polisaharid polifenol rastlino
Vzemite približno 20 mg tkivnega bloka in ga dajte v čisto 1,5 ml centrifugalno epruveto, dodajte 200 ul 200 mM raztopine NaOH, postavite na 95 ℃ za 10 minut, opazujte spremembo barve po lizi.
1. Če je barva lizata zelena ali svetlo rumena, pomeni, da je vsebnost tkivnih polifenolov nizka, zato je priporočljiva uporaba serije Foregene Plant.
2. Če je lizat rjavkasto-rumen ali rjavkasto-rdeč, to pomeni, da je vsebnost tkivnih polifenolov visoka, zato je priporočljiva uporaba Foregene Polysaccharide Polyphenol Plant Plus Series
Čas objave: 20. avgust 2021
