Encim Taq z vročim zagonom se pogosto uporablja.V primerjavi z navadno DNA polimerazo se lahko encim Taq z vročim zagonom učinkovito izogne ​​nekaterim nespecifičnim pomnoževanjem in tvorbi primerjev dimerjev ter lahko učinkovito izboljša stopnjo uspešnosti pomnoževanja ciljnega gena.Zlasti na področju genetskega testiranja je bil encim Taq z vročim zagonom opredeljen kot obvezen standard v industriji in navadne DNA polimeraze se ne sme uporabljati.Kot je razvidno iz zgoraj navedenega, se encimi Taq z vročim zagonom pogosto uporabljajo.Trenutno je na domačem trgu veliko blagovnih znamk encimov Taq za vroč zagon, vendar ni veliko encimov Taq visoke kakovosti za vroč zagon.Kako naj izberemo, ko se soočamo s tako številnimi izdelki z encimi Taq, ki se hitro začnejo?

1. Izberite encim Taq z vročim zagonom z visoko učinkovitostjo pomnoževanja

Učinkovitost pomnoževanja PCR je tesno povezana z delovanjem encima Taq.Ko je dober encimski reakcijski sistem Taq optimiziran, je učinkovitost pomnoževanja nad 95 %, obseg pomnoževanja začetne količine šablone pa širok.Zadovoljivo pomnoževanje je mogoče doseči, ko je vsebnost ciljnega gena nizka in ni lahko biti zastrupljen, ko je količina predloge visoka in je obdobje eksponentnega pomnoževanja dolgo.Za encim Taq s slabo zmogljivostjo, tudi če je bil reakcijski sistem večkrat optimiziran, je učinkovitost pomnoževanja še vedno manjša od 90 %, oblika "S" pomnoževalne krivulje ni očitna, naklon je majhen in krivulja je ravna.Ko je količina predloge majhna, je ni mogoče ojačati, in ko je količina predloge visoka, učinek ojačanja ni idealen.Zato je izbira polimeraz DNA z visoko učinkovitostjo pomnoževanja ključnega pomena za uspeh PCR in qPCR.

2. Izberite encim Taq za vroč zagon z močno encimsko močjo

Encimska moč encima Taq je povezana z učinkovitostjo pomnoževanja.Na splošno velja, da močnejša kot je encimska moč vročega zagona encima Taq, daljše je obdobje eksponentne rasti pomnoževanja PCR, bolj značilna je krivulja v obliki črke S, višja je vrednost fluorescenčnega signala in bolj primeren za multipleksno detekcijo PCR.Polimeraze DNA blagovnih znamk s šibko encimsko močjo lahko na splošno podpirajo samo 2-plex reakcije.Pri 3-pleksnih reakcijah je krivulja pomnoževanja nizka, vrednost fluorescenčnega signala nizka in ni tipične krivulje pomnoževanja, zato je rezultate težko oceniti.

3. Izberite encim Taq za vroč zagon z visoko občutljivostjo

Na splošno ima DNA polimeraza visoko učinkovitost pomnoževanja in visoko občutljivost, vendar obstajajo tudi nedoslednosti.Če je številčnost ciljnega gena v vzorcu, ki ga želite pomnožiti, nizka, je priporočljivo preizkusiti občutljivost pomnoževanja encima Taq.Najpogostejša metoda odkrivanja je izvedba 10- ali 5-kratne gradientne razredčitve fragmenta plazmida ciljnega gena, izvedba detekcije PCR pri nižji razredčitvi in ​​izbira vročega zagona encima Taq z večjo občutljivostjo zaznavanja.

Iz zgoraj navedenega je razvidno, da morajo raziskovalci izbirati glede na lastne eksperimentalne zahteve in pogoje financiranja.Najbolje je, da izvedete poskus pomnoževanja z gradientno razredčitvijo, da zaznate učinkovitost pomnoževanja in občutljivost encima Taq z vročim zagonom.

Primer Foregene's Taq DNA polimeraza:

Foreasy HS Taq DNA polimeraza

Opis

Foreasy HS Taq DNA Polymerase je DNA polimeraza, izražena v inženirskih bakterijah Escherichia coli s tehnologijo genske rekombinacije.Encim je kombiniran z edinstvenim reakcijskim pufrom, zaradi česar je izdelek zelo odporen in združljiv ter lahko neposredno uporabi vzorčni lizat (sistem Foregene Lysis) kot predlogo za detekcijske reakcije.

Aplikacija

Kvalitativna PCR in kvantitativna PCR detekcija prečiščenih in neprečiščenih predlog.

Kontrola kakovosti

1. Eksogena aktivnost nukleaze ni zaznana

2. Metoda PCR za odkrivanje rezidualne genomske DNA brez gostitelja

3. Lahko učinkovito pomnoži gene z eno kopijo v človeškem genomu

4. Shranjujte pri sobni temperaturi en teden, brez očitnih sprememb aktivnosti

Podrobnosti o izdelku: https://www.foreivd.com/foreasy-hs-taq-dna-polymerase-product/