Metode PCR in kontaminacija z aerosoli nukleinske kisline v laboratorijih za testiranje nukleinske kisline sta dve plati kovanca.Lahko se le odločimo, ali ga bomo imeli ali ne, ne moremo pa se odločiti, ali ga želimo ali porabiti.

1. Pregled odstranjevalca DNK

Da bi dosegli prostorsko odstranitev kontaminacije z aerosoli nukleinske kisline, je treba najprej presejati odstranjevalce DNK, ki lahko odstranijo nukleinske kisline v tekočem stanju.Ker ni veliko odstranjevalcev DNK, ki res delujejo.Za eksperimentalno metodo glejte: Odstranjevalec DNK ne more biti "skrivni kotiček" laboratorija!

V tem poskusu je bilo 100 kopij/µL (CT približno 31) plazmida ASFV in sredstva za odstranjevanje DNA, kvantificiranega z digitalno PCR, zmešanih v enakih volumnih in nato reagiralo pri sobni temperaturi 10 minut, 20 minut oziroma 30 minut.Po ekstrakciji nukleinske kisline smo izvedli pomnoževanje qPCR.Primerjali smo pozitivno kontrolo, pomešano s plazmidom in vodo.Ker poskus ni bil zaključen istočasno, lahko pride do določenega odstopanja med rezultati, ki pa ne vpliva na zaključek poskusa.Doslej sem ocenil 10 komercialnih izdelkov za odstranjevanje DNK.Le izdelki št. 1, št. 6 in št. 8 lahko učinkovito razgradijo plazmidno DNK v tekočem stanju.Drugi izdelki nimajo skoraj nobenega učinka.

Tabela 1 Učinek odstranjevanja nukleinske kisline s komercialno dostopnim odstranjevalcem DNK

2. Preizkus učinka odstranjevanja DNK pogosto uporabljenih razkužil

1. Preverjanje pogosto uporabljenih razkužil

Obstaja veliko vrst razkužil, ki se običajno uporabljajo v laboratorijih: aldehidi, fenoli, alkoholi, kvarterne amonijeve soli, peroksidi, klorovi pripravki ter kisline in baze.Dezinfekcijski učinki teh razkužil na mikroorganizme so v celoti preverjeni z eksperimenti, vendar pa ni dovolj eksperimentalnih podatkov o razgradnem učinku nukleinskih kislin.Laboratoriji za testiranje nukleinske kisline potrebujejo razkužilo, ki nima le dobrega razkužilnega učinka na mikroorganizme, ampak lahko tudi razgradi DNK.Rezultati testiranja kažejo, da le dva klorova pripravka 84 razkužila ter trikloroizocianurne kisline in 1 M klorovodikove kisline ustrezata zahtevam.Ker je 1 M klorovodikova kislina zelo jedka, je priporočljivo, da se klorovi pripravki uporabljajo kot odpadki v laboratorijih za testiranje nukleinskih kislin.Vendar so klorovi pripravki jedki za kovine in jih ni mogoče uporabiti za razkuževanje instrumentov in opreme.

Tabela 2 Učinki odstranjevanja DNK različnih vrst razkužil

2. Najmanjša efektivna koncentracija klorovih pripravkov

Dezinfekcijska sredstva na osnovi klora imajo močan učinek razgradnje DNK, vendar jih je zaradi njihove jedkosti in draženja kovin mogoče uporabiti za čiščenje tal, nekovinskih pultov, nastavkov za namakanje, centrifugalnih epruvet in drugih testnih predmetov.

V skladu z "Novimi tehničnimi smernicami za dezinfekcijo epidemije koronarne pljučnice": Onesnaževala (kri pacientov, izločki in bruhanje) razpoložljiv klor 5g/L-10g/L razkužilo, ki vsebuje klor;tla, stene in površine predmetov uporabite razpoložljiv klor 1g/L Klorovo razkužilo: oblačila, posteljnino in druge tekstilije najprej za 30 minut namočite v klorovo razkužilo z 0,5g/L razpoložljivega klora in nato očistite kot običajno.

Tabela 3 Učinek odstranjevanja DNK različnih koncentracij klorovega razkužila

Rezultati testa kažejo, da: ko je efektivna koncentracija klora večja ali enaka 1,2 g/L, lahko razkužilo, ki vsebuje klor, popolnoma razgradi 100 kopij/μL plazmida, če se uporablja 5 minut.Pri 10-minutnem delovanju lahko razkužilo 84 z efektivno koncentracijo klora, večjo ali enako 0,6 g/L, popolnoma razgradi 100 kopij/μL plazmidov.

3. Poskus odstranjevanja zraka, onesnaženega z aerosolom nukleinske kisline

Kako očistiti zrak, onesnažen z aerosoli nukleinske kisline?Večina misli je ustvariti okolje, onesnaženo z aerosoli, in ga nato očistiti ali očistiti nukleinske kisline po kontaminaciji.Zame je poskus, ki ga ni mogoče ponoviti in rezultatov poskusa ni mogoče kvantitativno analizirati, nesmiseln, zato sem si izposodil nekaj metod dezinfekcijskega razkuževanja zraka.Glejte "Splošne zahteve GB27948-2020 za razkužila zraka" in "Tehnične specifikacije za razkuževanje"

1. Testni materiali

1.1 Odstranjevalec DNK: V tem poskusu sta bila izbrana dva komercialno dostopna sredstva za odstranjevanje DNK 6 in 8 v tabeli 1.

1.2 Testni plazmid: glede na to, da bo vrednost CT večine laboratorijskih onesnaženj višja od 30, je koncentracija plazmida gena ASFV, uporabljenega tokrat, približno 100 kopij/μL, fluorescenčna kvantitativna PCR CT pa približno 31,07.Dodajte plazmid na kosmičeno vatirano palčko in posušite na zraku.

1.3 Testni instrument: Dezinfekcijski instrument Bilingkehan KVBOX, ki ga prijazno podpira Shenzhen Runlian Environmental Technology Co., Ltd., ima odlično zmogljivost razkuževanja zraka z razkužilom z vodikovim peroksidom in lahko učinkovito uniči spore in druge mikroorganizme.

1.4 Preskusni prostor: zaprto prestopno okno približno 0,1 kubičnega metra.

2. Preskusna metoda

Količina razkužila, nastavljena na dezinfekcijskem stroju, je 10 ml, koncentracija pa 100 ml/m3, kar je veliko višje od "GB27948-2020 splošnih zahtev za razkužila zraka": pri uporabi razkuževanja z aerosolnim razpršilom mora biti količina razkužila ≤10 ml/m3