V laboratorijih za PCR obstajata dve glavni vrsti tveganj: tveganja biološke varnosti in tveganja kontaminacije z nukleinsko kislino.Prvo škoduje ljudem in okolju, drugo pa vpliva na rezultate PCR testov.Ta članek govori o laboratorijskih točkah za spremljanje tveganja PCR in ustreznih stopnjah tveganja, ki so vam predstavljene.

01 Oddelek za PCR laboratorij

1. Laboratorij za testiranje molekularne biologije

V skladu z zahtevami člena 1.1 osnovnih standardov za laboratorije za klinično testiranje pomnoževanja genov so laboratoriji za PCR na splošno sestavljeni iz štirih območij: območja za shranjevanje in pripravo reagenta, območja za pripravo vzorca, območja pomnoževanja in območja analize produkta pomnoževanja.Če se uporablja metoda fluorescenčne PCR v realnem času, se lahko območje pomnoževanja in območje analize združita v eno območje;če se uporablja popolnoma avtomatiziran analizator PCR, je mogoče območje za pripravo vzorcev, območje za pomnoževanje in območje za analizo združiti v eno območje.

»Delovni zvezek za testiranje nukleinske kisline novega koronavirusa v zdravstvenih ustanovah (poskusna različica 2)« določa, da morajo laboratoriji, ki izvajajo testiranje nukleinske kisline novega koronavirusa, načeloma vzpostaviti naslednja območja: območje za shranjevanje in pripravo reagenta, območje za pripravo vzorcev, območje za pomnoževanje in analizo produkta.Ta tri področja bi morala biti v fizičnem prostoru popolnoma neodvisna drug od drugega in ne more biti neposredne komunikacije z zrakom.

2. Prostor za pripravo vzorcev

Čeprav lahko vzorce preprosto pripravimo v prostoru za pripravo vzorcev, je pri kompleksnih vzorcih in velikem številu vzorcev vseeno potrebna posebna soba za pripravo vzorcev.Prostor za pripravo vzorcev ima visoko tveganje za biološko varnost in kontaminacijo z nukleinsko kislino.

3. Prostor za obdelavo odpadkov

Nepravilno ravnanje z odpadki bo prineslo tudi veliko tveganje za biološko varnost in kontaminacijo laboratorija z nukleinsko kislino.Zato je treba prostor za obdelavo odpadkov redno nadzorovati.

02 Točke za spremljanje tveganja v PCR laboratorijih

Ločeni laboratoriji so razdeljeni na prostor za pripravo vzorcev, prostor za shranjevanje in pripravo reagentov, prostor za pripravo vzorcev, prostor za pomnoževanje in analizo produkta ter prostor za obdelavo odpadkov.

Glede na vrsto mesta vzorčenja ga delimo na površinsko, instrumentalno, vzorčno, okoljsko spremljanje in pipeto.

Stopnja tveganja se giblje od nizke do visoke od ene zvezdice★ do treh zvezdic★★★.

1. Prostor za pripravo vzorcev:

Uporablja se za registracijo, pripravo in inaktivacijo vzorcev, tveganje za biološko varnost pa je največje.Ker vzorci niso ekstrahirani in pomnoženi, razen pipet, ki pogosto pridejo v stik z vzorci, je tveganje za kontaminacijo nukleinske kisline v drugih delih majhno.

1-4 Vzorčenje na merilnih mestih

5-8 Vzorčenje na točki spremljanja

9-12 vzorčenje na merilni točki

1. Prostor za shranjevanje in pripravo reagenta:

Uporablja se za pripravo reagentov za shranjevanje, doziranje reagentov in pripravo reakcijske mešanice za pomnoževanje ter za shranjevanje in pripravo potrošnega materiala, kot so centrifugalne epruvete in konice pipet.Na tem območju ni neposrednega stika z vzorci in ni pozitivne nukleinske kisline, zato sta tveganje za biološko varnost in tveganje kontaminacije z nukleinsko kislino nizka.

13-16 Vzorčenje na merilnih mestih

17-22 Vzorčenje pri monitoringu
3. Točke priprave vzorca

Uporablja se za odpiranje soda za prenos, inaktivacijo vzorca (če je primerno), ekstrakcijo nukleinske kisline in dodajanje v reakcijsko epruveto za pomnoževanje itd. To področje lahko vključuje obdelavo in odpiranje vzorcev, tveganje za biološko varnost je visoko, izvede se ekstrakcija nukleinske kisline, tveganje kontaminacije z nukleinsko kislino pa je srednje do visoko.

29 Vzorčenje na merilnih mestih

4. Območje ojačanja in analize izdelka:

Uporablja se za pomnoževanje nukleinske kisline.To območje ne vključuje obdelave vzorcev in tveganje za biološko varnost je nizko.Pomnoževanje nukleinske kisline je predvsem v tem območju in tveganje za kontaminacijo nukleinske kisline je največje.

38 Vzorčenje na merilnih mestih
5. Prostor za obdelavo odpadkov:

Uporablja se za visokotlačno obdelavo vzorcev.Tveganja za biološko varnost pri obdelavi vzorcev na tem območju so razmeroma visoka.S produkti pomnoževanja nukleinske kisline je priporočljivo ravnati kot z medicinskimi odpadki.Visok pritisk ni priporočljiv, tveganje za kontaminacijo z nukleinsko kislino pa je majhno.

43-44 Vzorčenje na merilnih mestih

03 Izvajati

Tokrat smo našteli 44 točk opazovanja.Ocenjuje se, da se mora veliko ljudi vprašati, ali morajo narediti toliko točk?Da, naredi vse!Predlagam, da najprej opravite oceno tveganja lastnega laboratorija, ki se lahko izvaja glede na tveganje od visokega do nizkega, lahko tudi spremljate istovrstne vzorce skupaj ali pa pripravite načrt vzorčenja za redni monitoring.Skratka, vsak laboratorij lahko glede na svojo situacijo naredi svoj izvedbeni načrt.Največje tveganje za laboratorije za testiranje je, da jih zanemarijo.