Komplet za izolacijo krvne RNK
Opis kompleta:
kat.št.RE-04011/04013
Za popolno čiščenje RNA iz polne krvi 104 ≤ belih krvnih celic ≤ 107
Hitro izolirajte in očistite krvno RNA iz belih krvnih celic.
- Ni vam treba skrbeti za razgradnjo RNA.Celoten komplet je brez RNaze
-Enostavno—vse operacije se izvedejo pri sobni temperaturi
-Hitro—operacija se lahko zaključi v 20 minutah
-Visok izkoristek RNA: kolona samo za RNA in edinstvena formula lahko učinkovito očistita RNA
-Varno—ni uporabljen organski reagent
-Velika zmogljivost obdelave vzorcev—vsakič je mogoče obdelati do 200 μl vzorcev.
-Visoka kakovost—prečiščena RNA je zelo čista, brez beljakovin in drugih nečistoč ter lahko ustreza različnim nadaljnjim eksperimentalnim aplikacijam.
Opisi
Komplet uporablja vrtljivo kolono in formulo, ki jo je razvilo naše podjetje, ki lahko učinkovito ekstrahira visoko čisto in visokokakovostno celotno RNK iz antikoagulirane polne krvi.Komplet vsebuje lizat rdečih krvnih celic (Buffer RCL), ki lahko hitro in učinkovito lizira rdeče krvne celice in zadrži bele krvne celice.Učinkovita DNA-Cleaning Colunm zlahka loči supernatant in celične lizate ter adsorbira in odstrani genomsko DNK.Operacija je preprosta in prihrani čas;Kolona samo za RNA lahko učinkovito veže RNA in z edinstveno formulo lahko obdela veliko število vzorcev hkrati.
Celoten sistem brez RNaze naredi ekstrahirano RNA nerazgradljivo;Buffer RW1 in Buffer RW2 pralni sistem pufra naredi pridobljeno RNA brez beljakovin, DNA, ionov in onesnaženja z organskimi spojinami.
Vsebina kompleta
| Komplet za izolacijo celotne RNK v krvi | ||
| Sestava kompleta | RE-04011 | RE-04013 |
| 50-krat | 200-krat | |
| Medpomnilnik RCL (10×) | 52,5 ml | 210 ml |
| Medpomnilnik BRL1* | 30 ml | 120 ml |
| Medpomnilnik BRL2 | 18 ml | 66 ml |
| Medpomnilnik RW1* | 25 ml | 100 ml |
| Medpomnilnik RW2 | 24 ml | 96 ml |
| ddH brez RNaze2 O | 10 ml | 40 ml |
| Stolpec samo za RNA | 50 kompletov | 200 kompletov |
| Kolona za čiščenje DNK | 50 kompletov | 200 kompletov |
| priročnik | 1 izvod | 1 izvod |
Značilnosti in prednosti
- Ni vam treba skrbeti za razgradnjo RNA.Celoten komplet je brez RNaze.
-Enostavno—vse operacije se izvedejo pri sobni temperaturi.
-Hitro—operacija se lahko zaključi v 20 minutah.
-Visok izkoristek RNA: kolona samo za RNA in edinstvena formula lahko učinkovito očistita RNA.
-Varno—ni uporabljen organski reagent.
-Velika zmogljivost obdelave vzorcev—vsakič je mogoče obdelati do 200 μl vzorcev.
-Visoka kakovost—prečiščena RNA je zelo čista, brez beljakovin in drugih nečistoč ter lahko ustreza različnim nadaljnjim eksperimentalnim aplikacijam.
Parametri kompleta
Aplikacija kompleta:
Primeren je za ekstrakcijo in čiščenje celotne RNK iz polne krvi sesalcev.
Potek dela
Pogoji shranjevanja
Puffer RCL (10×) je treba hraniti pri 2-8 ℃;druge komponente kompleta lahko shranite pri sobni temperaturi (15-25 ℃) v suhih pogojih in jih lahko shranite 12 mesecev.Pufer BRL1 lahko hranite pri 4 ℃ 1 mesec po dodajanju β-merkaptoetanola (neobvezno).
Opomba: Če je raztopina shranjena pri nizki temperaturi, je nagnjena k precipitaciji.Pred uporabo raztopino v kompletu za nekaj časa postavite na sobno temperaturo.Po potrebi ga segrevajte v vodni kopeli pri 37°C 10 minut, da se oborina raztopi, in pred uporabo dobro premešajte.
Navodila za analizo problemov
The following is an analysis of the problems that might be encountered in the extraction of viral RNA. We wish it would be helpful to your experiment. In addition, for other experimental or technical problems other than operating instructions and problem analysis, we have dedicated technical support to help you. Contact us if you need at : 028-83361257or E-mail：Tech@foregene.com。
RNK ni mogoče ekstrahirati ali pa je izkoristek nukleinske kisline nizek
Običajno obstaja veliko dejavnikov, ki vplivajo na učinkovitost predelave, kot so: vsebnost RNA vzorca, način delovanja, volumen elucije itd.
Analiza pogostih vzrokov:
1. Ledena kopel ali nizkotemperaturno (4 °C) centrifugiranje med delovanjem.
Predlog: Delovanje pri sobni temperaturi (15-25 °C), nikoli ledena kopel in nizkotemperaturna centrifuga.
2. Nepravilno shranjevanje vzorca ali predolgo shranjevanje vzorca.
Predlog: Vzorce hranite pri -80 °C ali zamrznite v tekočem dušiku in se izogibajte ponavljajoči se uporabi pri zamrzovanju in odmrzovanju;poskusite uporabiti sveže zbrane vzorce za ekstrakcijo RNA.
3. Nezadostna liza vzorca
Priporočilo: Prepričajte se, da sta vzorec in delovna raztopina (linearni akrilamid) temeljito premešana in inkubirana 10 minut pri sobni temperaturi (15-25 °C)
4.Eluent je bil dodan nepravilno
Priporočilo: Prepričajte se, da je ddH2O brez RNaze dodan na sredino membrane čistilne kolone
5. Neustrezna prostornina brezvodnega etanola v pufru viRW2
Predlog: Prosimo, sledite navodilom, dodajte pravo količino brezvodnega etanola v pufer viRW2 in dobro premešajte pred uporabo kompleta.
6. Nepravilna uporaba vzorca.
Predlog: 200 µl vzorca na 500 µl pufra viRL.Prevelika količina vzorca bo povzročila zmanjšano stopnjo ekstrakcije RNK.
7. Neustrezen volumen elucije ali nepopolna elucija.
Predlog: Volumen eluenta čistilne kolone je 30-50 μl;če učinek elucije ni zadovoljiv, je priporočljivo dodati predhodno segret ddH brez RNaze2O in podaljšajte čas postavitve na sobno temperaturo, na primer 5-10 minut
8. Čistilna kolona ima ostanek etanola po izpiranju v pufru viRW2.
Predlog: Če po izpiranju v pufru viRW2 in 2-minutnem centrifugiranju v prazni epruveti še vedno ostane etanol, lahko čistilno kolono po centrifugiranju v prazni epruveti pustite 5 minut pri sobni temperaturi, da v celoti odstranite preostali etanol.
Razgradnja prečiščenih molekul RNA
Kakovost prečiščene RNA je povezana z dejavniki, kot so shranjevanje vzorca, kontaminacija RNaze in delovanje.
Analiza pogostih vzrokov:
1. Zbrani vzorci niso bili pravočasno shranjeni.
Predlog: Če vzorca ne uporabite pravočasno po odvzemu, ga takoj shranite pri -80 ℃ ali na tekoči dušik.Za ekstrakcijo molekul RNA poskusite uporabiti sveže zbrane vzorce, kadar koli je to mogoče.
2. Zbrani vzorci so se večkrat zamrznili in odtajali.
Predlog: med zbiranjem in shranjevanjem vzorca se izogibajte ponavljajočemu se zamrzovanju in odmrzovanju (ne več kot enkrat), sicer se bo izkoristek nukleinske kisline zmanjšal.
3. RNaza je bila uvedena v operacijski sobi ali pa se niso uporabljale rokavice za enkratno uporabo, maske itd.
Predlog: Poskus ekstrakcije molekul RNK je najbolje izvesti v ločeni sobi za operacijo RNK, pred poskusom pa se poskusna miza očisti.Med poskusom nosite rokavice in maske za enkratno uporabo, da se izognete razgradnji RNK zaradi vnosa RNaze.
4. Reagent je med uporabo kontaminiran z RNazo.
Predlog: zamenjajte z novim kompletom za izolacijo virusne RNA za sorodne poskuse.
5. Kontaminacija centrifugalnih epruvet, konic pipet itd. z RNazo. Predlog: Prepričajte se, da so vse centrifugalne epruvete, konice pipet in pipete brez RNaze.
Očiščene molekule RNA so vplivale na nadaljnje poskuse
Molekule RNA, prečiščene s čistilno kolono, bodo vplivale na nadaljnje poskuse, če je preveč solnih ionov ali beljakovin, kot so: reverzna transkripcija, Northern Blot itd.
1. V eluiranih molekulah RNA so preostali ioni soli.
Priporočilo: Prepričajte se, da je bila pufru viRW2 dodana ustrezna količina brezvodnega etanola, in čistilno kolono dvakrat sperite v skladu s pravilno hitrostjo centrifugiranja v navodilih za uporabo；Če so še vedno preostali ioni soli, lahko v čistilno kolono dodate pufer viRW2 in jo pustite pri sobni temperaturi 5 minut.Nato izvedite centrifugiranje, da v največji meri odstranite kontaminacijo z ioni soli
2. V eluiranih molekulah RNA je preostali etanol
Predlog: ko potrdite, da so bile čistilne kolone izprane s pufrom viRW2, izvedite centrifugiranje s prazno epruveto v skladu s centrifugalno hitrostjo v navodilih za uporabo.Če še vedno ostane etanol, ga lahko po centrifugiranju v prazni epruveti pustite 5 minut pri sobni temperaturi, da v največji meri odstranite preostali etanol.
Navodila za uporabo:
Priročnik z navodili za komplet za izolacijo virusne RNA
