Lnc-RT Heroᵀᴹ I (z gDNazo) (super predmešanica za sintezo prve verige cDNA iz lncRNA)
Specifikacije
25×20μl Rxns, 50×20μl Rxns
Lnc-RT HeroTM I (z gDNazo) je sistem reverzne transkripcije, posebej razvit za lncRNA za hitro odstranjevanje kontaminacije genomske DNA.5×gDNase Mix lahko hitro odstrani preostali genom v RNA pri 42 °C za 2 minuti, s čimer se učinkovito izogne motnjam genoma v rezultatih qPCR.
5×L-RT HeroTM Mix vsebuje reverzno transkriptazo Foregene LncRNA, ki jo je posebej razvil Foregene in je nova vrsta reverzne transkriptaze posebej za lncRNA in druge dolge kompleksne predloge RNA, z močnejšo afiniteto RNA in večjo učinkovitostjo reverznega zapisa.Optimiziran sistem omogoča hitrejšo hitrost povratne transkripcije in lahko enostavno prepiše predloge RNA z visoko vsebnostjo GC in kompleksno sekundarno strukturo.Sinteza prve verige cDNA se lahko zaključi pri 42 °C v 15 minutah.
Sestavni deli kompleta
| 5× gDNase mešanica |
| 5× L-RT HeroTM Mix |
| ddH2O brez RNaze |
| Navodila |
Značilnosti in prednosti
■Učinkovita sposobnost odstranjevanja gDNA, ki lahko odstrani gDNA v predlogi v 2 minutah.
■ Lahko učinkovito obrne transkripcijo lncRNA.Ko je produkt reverzne transkripcije izpostavljen qPCR, je vrednost Ct nižja kot pri običajnem sistemu reverzne transkripcije.
■ Učinkovit sistem reverzne transkripcije, potrebuje le 15 minut za dokončanje sinteze prve verige cDNA.
■ Kompleksne predloge: predloge z visoko vsebnostjo GC in kompleksno sekundarno strukturo je mogoče tudi obrniti z visoko učinkovitostjo.
■ Visoko občutljiv sistem povratne transkripcije, predloge na ravni pg lahko pridobijo tudi visoko kakovostno cDNA.
■ Sistem reverzne transkripcije ima visoko termično stabilnost, optimalna reakcijska temperatura je 42℃, in ima pri 50 še vedno dobro zmogljivost obratnega prepisa℃.
Aplikacija kompleta
Relativna kvantitativna analiza lncRNA.
Absolutna kvantitativna analiza lncRNA.
Lahko hitro in natančno analizira RNK v sledovih, kot je virus RNK.
Reverzna transkripcija predlog RNK z visoko vsebnostjo GC ali kompleksno sekundarno strukturo.
Potek dela
Shranjevanje in rok uporabnosti
Komplet naj bo shranjen pri -20°C. Izdelek hranite v hladilniku s konstantno temperaturo pri -20°C takoj po prejemu.Če so pogoji shranjevanja ustrezni, izdelek ne bo poslabšal delovanja v 1-letnem obdobju veljavnosti.
Vodnik za analizo problemov
The following is an analysis of the problems that may be encountered in the use of Lnc-RT HeroTM I (With gDNase) series kits, hoping to be helpful to your experiments. In addition, we have dedicated technical support to help you with other experimental or technical problems beyond the operating instructions and questions. If you have any needs, please contact us: 028-83361257 or E-mail: Tech@foregene.com.
Non-specifično ojačanje
1. Nerazumna zasnova temeljnega premaza
Priporočilo: Oblikujte temeljne premaze v skladu z načeli oblikovanja temeljnih premazov.
2. Ostanki genoma.
Predlog: Prepričajte se, da je temperatura reakcije pri prvem koraku odstranjevanja gDNA 42 °C, reakcijski čas pa je mogoče tudi podaljšati na 5 minut.
Ni pomnoženega signala z RT-qPCR
1. RNA se razgradi.
Priporočilo: Material za ekstrakcijo RNK naj bo čim bolj svež, uporabljena naj bo kakovostna in čista RNK.
2. RNA vsebuje inhibitorje.
Priporočilo: zaviralci reverzne transkripcije običajno vključujejo SDS, gvanidinske soli, EDTA itd. Priporočljivo je, da oborino RNA sperete s 70 % etanolom, da odstranite zaviralce.
3. Težave z zasnovo primerja.
Priporočilo: V skladu z načelom oblikovanja temeljnih premazov preoblikujte temeljne premaze za pregled.
Ciljni pas se prikaže v prazni kontroli
1. Kontaminacija delovnega orodja ali reagentov.
Priporočilo: Vse reagente ali opremo za poskus je treba avtoklavirati.Pri rokovanju bodite previdni in nežni, da preprečite, da bi se vzorci DNK posrkali v pipeto ali polili iz centrifugalne epruvete.
2. Do kontaminacije je prišlo med pripravo reakcijskega sistema PCR.
Priporočilo: Pri ravnanju upoštevajte potrebne varnostne ukrepe, kot so: nošenje rokavic iz lateksa, uporaba filtrirnih nastavkov.Uporabite mešanico PCR v realnem času v sistemu, odpornem na kontaminacijo.
3. Primerji se razgradijo.
Predlog: Uporabite elektroforezo SDS-PAGE, da ugotovite, ali so primerji razgrajeni, in jih zamenjajte z novimi primerji za poskuse zaznavanja fluorescence.
Navodila:
