Komplet ForeDirect RT-qPCR
Opis kompleta:
◮Za neposredno pomnoževanje RNK v realnem času iz zbirk brisov brez postopkov čiščenja RNK.Ta komplet zaključi cikle qRT-PCR v eni uri.Mešanica encimov je optimizirana mešanica reverzne transkriptaze, Hot-Start Taq DNA polimeraze, inhibitorja RNaze.Reakcijski pufer vsebuje vse zahtevane komponente, vključno z optimiziranimi komponentami pufra, Mg2+, dUTP in dNTP.
Opis
Komplet ForeDirect RT-qPCR je zasnovan za neposredno pomnoževanje RNA v realnem času iz zbirk brisov brez postopkov čiščenja RNA.Ta komplet zaključi cikle qRT-PCR v eni uri.Mešanica encimov je optimizirana mešanica reverzne transkriptaze, Hot-Start Taq DNA polimeraze, inhibitorja RNaze.Reakcijski pufer vsebuje vse zahtevane komponente, vključno z optimiziranimi komponentami pufra, Mg2+, dUTP in dNTP.
Specifikacije
100T
Sestavni deli kompleta
| Sredstvo za sproščanje nukleinske kisline |
| RNA zaščita |
| 2× RT-qPCR medpomnilnik |
| Encimska mešanica (Taq&M-MLV) |
| Navodila |
Aplikacija PCR
1. Ko so bile reakcijske epruvete PCR na kratko centrifugirane, jih postavite v posodo za vzorec instrumenta za pomnoževanje.
2. Toplotni protokol
| korak | Temperatura | Čas | Cikli | |
| 1 | Povratni prepis | 50 ℃ | 15 minut | 1 |
| 2 | Preddenaturacija | 95 ℃ | 1 min | 1 |
| 3 | Denaturacija | 95 ℃ | 10 sekund | 42 |
| 4 | Žarjenje/podaljšanje | 60 ℃ | 30 sekund | |
Opomba:Fluorescentni signal je bil zaznan takoj po podaljšanem koraku vsakega cikla.
3. Po nastavitvi shranite datoteko in zaženite reakcijski program.
Koraki delovanja
Pred pripravo reagenta je treba vse reagente v kompletu odtaliti pri sobni temperaturi in nežno premešati.
Priprava reagenta
1. Pripravite mešanico za sproščanje nukleinske kisline
| Komponenta | Volumen na vzorec ali kontrolo |
| Sredstvo za sproščanje nukleinske kisline | 5 μL |
| RNA zaščita | 0,5 μL |
2. Pripravite reakcijsko mešanico
| Komponenta | Volumen na vzorec ali kontrolo |
| 2× RT-qPCR medpomnilnik | 15 μL |
| Encimska mešanica (Taq&M-MLV) | 1,5 μL |
| Primerji in sonde | 1 μL |
Shranjevanje in rok uporabnosti
-Komplet naj bo shranjen pri -20± 5℃.Rok veljavnosti je 12 mesecev.
- Izogibajte se ponavljajočim se ciklom zamrzovanja in odmrzovanja (<5 ciklov).
