Komplet za neposredno RT-qPCR
Opis kompleta:
◮ Komplet Direct RT-qPCR, ki uporablja Foreasy Reverse Transcriptase in Foreasy HS Taq DNA Polymerase, ki ga razvija Foregene, z edinstvenim reakcijskim pufrom, omogoča ta komplet visoko odpornost in združljivost ter lahko neposredno testira reakcijo z uporabo Foregene Lysis sistema kot predloge.Ta komplet se lahko uporablja za komplet za odkrivanje nukleinske kisline COVID-19 in razvoj kompleta za odkrivanje nukleinske kisline drugih patogenih bakterij.
Opis
Komplet Direct RT-qPCR zagotavlja ločeno pakiran pufer RT-qPCR in visoko učinkovit encimmešanica (Taq、M-MLV、RI), zaradi česar je priročna za ustvarjanje zalednih kompletov in sistemaprilagoditev, znotraj enostavnega preverjanja.
Specifikacije
500T, 50.000T
Sestavni deli kompleta
| Vsebina kompleta (20 μL reakcijski sistem) | IM-05111-01 | IM-05112-01 |
| 500 T | 50.000 T | |
| Neposredna encimska mešanica | 500 μL×1 | 50 ml×1 |
| 2× neposredni medpomnilnik RT-qPCR | 1 ml×5 | 500 ml×1 |
| Navodilo | 1 | 1 |
Koraki delovanja
Pred pripravo reagenta je treba vse reagente v kompletu odtaliti pri sobni temperaturi in nežno premešati.
A: Pripravite se of predlogo in reagent
1. Pripravite pripravljeno šablono RNA (priporočljivo je, da za ekstrakcijo in čiščenje šablone RNA uporabite serijski komplet Foregene Total RNA Isolation Kit) ali izdelek za razbijanje vzorca (priporočljivo je uporabiti sistem Foregene Lysis), posebne primerje (10 μM) in druge ustrezne potrošne materiale, instrument.
2. Vstavite 2 × neposredni pufer RT-qPCR, ddH2O brez RNaze in 20 × referenčno barvilo ROX (če je'je potrebno) v škatli z ledom, tako da se ti naravno stopijo in nežno premešajo.
B: Pripravite se of RT-qPCR sistem
Tabela 1 : Pripravite se of RT-qPCR system
| Komponenta | Glasnost | Končna koncentracija |
| 2× neposredni medpomnilnik RT-qPCR | 10 μL | 1× |
| Neposredna encimska mešanica | 1μL | |
| Forward Primer (10 μM) | 0,8 μL | 50-900 nM |
| Reverse Primer (10 μM) | 0,8 μL | 50-900 nM |
| Sonda (4 μM) | 1μL | 200 nM |
| Predloga (RNA ali lizat) | X μL | |
| 20×ROX referenčno barvilo | - | 1* |
| RNaze-FreeddH2O | (6,4-X) μl | |
| Skupna prostornina | 20μL |
C: Set the RT-qPCR reakcija program
Tabela 2 : RT-qPCR reaction program nastavitev (za primer: dva-korak metoda)
| korak | Temperatura | Čas | Cikli | Vsebina | |
| 1 | 50 ℃ | 15 min | 1* | 1 | Povratni prepis |
| 2 | 95 ℃ | 1 min | 1 | Preddenaturacija | |
| 3 | 95 ℃ | 10 sekund | 40-45 | Denaturacija | |
| 60 ℃ | 30 s 2* | Žarjenje/podaljšanje | |||
Shranjevanje in rok uporabnosti
-Komplet naj bo shranjen pri -20± 5℃.Rok veljavnosti je 12 mesecev.
- Izogibajte se ponavljajočim se ciklom zamrzovanja in odmrzovanja (<5 ciklov).
