QuickEasyᵀᴹ Real Time PCR Kit-Taqman
Opisi
2× QuickEasyTMReal PCR Mix-Taqman, ki ga zagotavlja QuickEasyTMReal Time PCR Kit-Taqman kit je sistem glavne mešanice nove generacije, zasnovan za reakcijo pomnoževanja PCR v realnem času z uporabo posebnih fluorescentnih sond.Njegovo jedro DNA polimeraze Foregene HS Taq temelji na modifikaciji protiteles, ki se uporablja v povezavi z dodatno optimiziranim sistemom PCR Foregene, ima večjo specifičnost in učinkovitost pomnoževanja.V primerjavi z običajno mešanico PCR ima močnejšo sposobnost pomnoževanja in nižjo stopnjo neujemanja.Uporablja se lahko v fluorescenčni kvantitativni PCR reakciji za zmanjšanje nespecifičnega pomnoževanja in izboljšanje natančnosti PCR.Lahko močno izboljša specifičnost izdelka in občutljivost reakcije.Hkrati je bil ROX zagotovljen kot notranja referenčna barva.
QuickEasyTMReal Time PCR Kit-Taqman komplet ima širok obseg uporabe glede na količino predloge in lahko pridobi dobro standardno krivuljo v različnih kvantitativnih regijah ter lahko natančno kvantificira in zazna ciljne gene z dobro ponovljivostjo in visoko stopnjo zaupanja.
Specifikacije
200 priprav,500 priprav,1000 priprav,2000 Priprave
Sestavni deli kompleta
QuickEasyTMReal Time PCR Kit-Taqman(20μlsistem) | ||||
Vsebina kompleta | QP-01121 | QP-01122 | QP-01123 | QP-01124 |
200 priprav | 500 priprav | 1000 priprav | 2000 Priprave | |
2×hitroenostavnoTM Pravi PCR Zmešajte-Taqman | 1 ml×2 | 1,7 ml×3 | 1,7 ml×6 | 1,7 ml×12 |
20×Referenčno barvilo ROX | 200μL | 0,5 ml | 1 ml | 1 ml×2 |
ddH brez DNaze2O | 1,7 ml | 1,7 ml×2 | 10 ml | 20 ml |
ČE TI | 1kos | 1kos | 1kos | 1kos |
Značilnosti in prednosti
■ Edinstven sistem za optimizacijo PCR omogoča 2×QuickEasyTMReal PCR Mix-Taqman bolj združljiv.
■ Polimeraza Foregene HS Taq z vročim zagonom ima večjo učinkovitost pomnoževanja, večjo občutljivost pomnoževanja in večjo specifičnost pomnoževanja.
■ 2× QuickEasyTM Real PCR Mix -Taqman uporablja edinstven sistem, ki ga je optimiziral Foregene za izboljšanje občutljivosti in specifičnosti zaznavanja sonde, specifične za zaporedje, ki se lahko uporablja za genotipizacijo in določanje variacije števila kopij ter pridobitev natančnih rezultatov.
■ Ta izdelek je opremljen z notranjim referenčnim barvilom ROX, ki ga je mogoče uporabiti za odpravo ozadja signala in napake signala med vdolbinicami, kar je uporabnikom priročno za uporabo v različnih vrstah kvantitativnih instrumentov PCR.
Aplikacija kompleta
■ Fluorescenčna kvantitativna PCR za kvantitativno analizo predloge;
■ Ckonvencionalno PCR pomnoževanje;
■ Uporablja se lahko za odkrivanje alelov.
Shranjevanje in rok uporabnosti
Komplet je treba hraniti pri -20°C v temi;če ga pogosto uporabljamo, ga lahko kratek čas hranimo tudi pri 4°C (porabimo v 10 dneh).
Načela zasnove primerja PCR v realnem času
Forward Primer in Reverse Primer
Za PCR v realnem času je zasnova primerja zelo pomembna.Primerji so povezani s specifičnostjo in učinkovitostjo pomnoževanja PCR in jih je mogoče oblikovati ob upoštevanju naslednjih načel:
Dolžina primerja: 18-30bp.
GC vsebnost: 40-60 %.
Vrednost Tm: programska oprema za načrtovanje primerja, kot je Primer 5, lahko poda vrednost Tm primerja.Vrednosti Tm zgornjih in spodnjih primerjev morajo biti čim bližje.Uporabite lahko tudi formulo za izračun Tm: Tm = 4 °C (G + C) + 2 °C (A + T).Pri izvajanju PCR je kot temperatura žarjenja običajno izbrana temperatura pod vrednostjo Tm primerja 5 °C (ustrezno zvišanje temperature žarjenja lahko poveča specifičnost reakcije PCR).
Primerji in produkti PCR:
Dolžina produkta PCR pomnoževanja primerja načrta je prednostno 100-150 bp.
V največji možni meri se je treba izogibati temeljnim premazom za oblikovanje v sekundarnem strukturnem območju šablone.
Izogibajte se nastanku 2 ali več komplementarnih baz med 3' koncema zgornjih in spodnjih primerjev.
Primer 3' končna baza ne more biti prisotna s 3 dodatnimi zaporednimi G ali C.
Sami primerji ne morejo imeti komplementarnih struktur, sicer se bo oblikovala lasna struktura, ki bo vplivala na pomnoževanje PCR.
ATCG je treba porazdeliti čim bolj enakomerno v zaporedju primerja, 3' terminalni bazi pa se je treba izogibati, saj T.
Dodatek 1: dopolnilni paket komponent kompleta Cell Direct RT-qPCR
1.Raztopina za lizo celic
| |||
Sestavni deli kompleta (sistem za lizo s 24 vdolbinicami/vdolbinica) | DRT-01011-A1 | DRT-01011-A2 | |
100 T | 500 T | ||
deljaz | Medpomnilnik CL | 20 ml | 100 ml |
Foregene Protease Plus II | 400 μl | 1 ml × 2 | |
Medpomnilnik ST | 1 ml × 2 | 10 ml | |
delII | DNK radirka | 400 μl | 1 ml × 2 |
2.RT mešanica
| |
Sestavni deli kompleta (20 μl reakcijski sistem) | DRT-01011-B1 |
200 T | |
5× Direct RT Mix | 800 μl |
ddH brez RNaze2O | 1,7 ml × 2 |
| ||
Sestavni deli kompleta (20 μl reakcijski sistem) | DRT-01011-C1 | DRT-01011-C2 |
200 T | 1000 T | |
2× Direct qPCR Mix-SYBR | 1 ml × 2 | 1,7 ml × 6 |
50 × ROX referenčno barvilo | 40 μl | 200 μl |
ddH brez RNaze2O | 1,7 ml | 10 ml |